一、推送：大鼠瘦素(LEP）ELISA试剂盒实验原理

推送：是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（elisa）。往预先包被大鼠大鼠瘦素(LEP）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠大鼠瘦素(LEP）抗体呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

二、产品信息

指标名称：推送：

规格：48T/ 96T

品牌：研启生物

检测波长：450nm

所需样本体积：量50ul

适用范围：仅供科研课题研究，不得用于临床诊断。

检测样本种类：血清，血浆，尿液，组织匀浆，细胞上清液，脑脊液，灌洗液，粪便等样本.

臻科供应属种有：人、大鼠、小鼠、猴子、猪牛羊、犬、鸡鸭鹅、植物、鱼、昆虫ELISA试剂盒等

试剂盒保存：2-8℃冷藏保存，保质期6个月。

三、推送：大鼠瘦素(LEP）ELISA试剂盒独特优势

1、我司产品具有灵敏度高、特强、重复性好等特点，吸附性能好,空白值低，并适用于血清血浆 组织匀浆等多种样本类型的检测，方法简便，操作简单。 

2、产品质量可靠，出库质检把控严格，顺丰快递，运输全程跟踪，有任何质量问题包退换，诚信经营，合作共赢。  

3、凡是订购我司任何一款ELISA试剂盒，享全程技术指导并可免费代测。全程有业技术老师负责代测，收到样本一般5个工作日出结果。

4、我司具有完善的售后服务体系，设立售后服务中心，24小时及时响应，真正做到后顾无忧，不断完善服务体系。

四、标本处理要求

1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

五、推送：大鼠瘦素(LEP）ELISA试剂盒操作流程

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

六、特别说明

上海研启生物科技有限公司供应各类科研产品，包括elisa试剂盒、农残试剂盒、生化试剂盒、生物试剂、检测卡等高质量产品。公司本着客户至上的原则为客户提供高品质的可靠产品，如有任何质量的问题请打电话与我司工作人员联系,免费包退换（非人为因素造成的）。公司产品优惠活动进行中，欢迎新老客户来选购。

特别提醒：

1.试剂盒保存在2-8℃，使用室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用充分摇匀。

原创作者：上海研启生物科技有限公司